實驗室常用細胞裂解方法介紹
點擊次數：339 更新時間：2024-03-11
細胞破碎是指利用外力破壞細胞膜和細胞壁,使細胞內容物包括目的產物成分釋放出來的技術,是分離純化細胞內合成的非分泌型生化物質(產品)的基礎。結合重組DNA技術和組織培養技術上的重大進展,以前認為很難獲得的蛋白質現在可以大規模生產。
??但是由于細菌、酵母、植物細胞壁的組成成分不同,且同類細胞結成的網狀結構也不同,所以其細胞壁的堅固程度不同。而動物細胞雖沒有細胞壁,但具有細胞膜,也需要一定的細胞破碎方法來破膜,達到提取產物的目的。
一般用物理或者化學方法來使得細胞裂解
物理法：
（1）反復凍融：將細胞反復放置于-20℃冷凍以及25-30℃環境下，反復冷凍溶解10次-20次。適用于例如血細胞等大部分哺乳動物細胞。
（2）煮沸法：與凍融法相反，將細胞放置于100℃沸水煮沸5-10分鐘，適用于大部分微生物細胞。
（3）超聲法：將細胞放置于超聲破碎儀中，以一定頻率的超聲破碎細胞，適用于絕大部分微生物細胞。
（4）滲透壓法：將血細胞等細胞膜較為薄弱的細胞放置于純水等低滲溶液，細胞吸收大量水分破解。
（5）液氮法：植物細胞一般采用液氮捻磨的方法破解細胞。
化學法:
（1）強酸、強堿溶液：一般應用0.5N NaOH溶液可以裂解絕大部分動物細胞和微生物細胞。
（2）生物酶：一般用溶jun酶、蛋白酶K等酶裂解微生物細胞。
