上海遠慕生物科技有限公司

蛋白質怎么在制備過程中保持蛋白活性?
點擊次數:474 更新時間:2022-12-16

蛋白質的制備是一項十分細致的工作。涉及物理學、化學和生物學的知識很廣。高分子蛋白質具有一定的立體構象,相當不穩定,極易變性、變構,為得到天然狀態的蛋白質,盡量采用溫和的手段,如中性、低溫、避免起泡等,還要注意防腐。

試劑盒2.jpg

動物材料中的蛋白質有些可溶的形式存在于體液(如血漿、消化硫等)中,可以不必經過提取直接進行分離。蛋白質中的角蛋白、膠原及絲蛋白等不溶性蛋白質,只需要適當的溶劑洗去可溶性的伴隨物,如脂類、糖類以及其他可溶性蛋白質,最后剩下的就是不溶性蛋白質。這些蛋白質經細胞破碎后,用水、xi鹽酸及緩沖液等適當溶劑,將蛋白質溶解出來,再用離心法除去不溶物,即得粗提取液。

整個制備過程一般可分為5 個階段:①材料的選擇和預處理,②細胞的破碎(有時需進行細胞器的分離),③提取,④純化(包括鹽析,有機溶劑沉淀,有機溶劑提取、吸附、層析、超離心及結晶等),⑤濃縮、干燥及保存。以上5 個階段不是要求每個方案都完整地具備,也不是每一階段截然分開。

不論是哪一階段使用哪一種方法,均必須在操作中保持生物大分子結構的完整性。保存活性,防止變性及降解現象的發生。因空間結構主要依靠氫鍵、鹽鍵和范德華力的存在,遇酸、遇堿、高溫、劇烈的機械作用及強烈的輻射等均可導致活性喪失。

細胞破碎方法有多種,比如機械法(如組織搗碎勻漿機、玻璃勻漿器)、物理法(反復凍融法、冷熱交替法、超聲波法、高壓破碎),化學及生物化學法(加入有機溶劑、溶解酶或裂解酶、表面活性劑)等。

高壓細胞破碎法是一種物理破碎方法,避免了化學法和酶法等導致的化學物殘留和污染等問題。超聲破碎法可能出現的起泡現象在高壓破碎時是不會出現的。

樣品經適當預處理,再配合使用低溫超高壓連續流細胞破碎儀,提取到的蛋白質活性好。(參考文獻:氯氟氰菊酯對德國小蠊保護酶活性的影響,中國媒介生物學及控制雜志,2009,20(4):303-306)。這是因為在細胞破碎過程中,低溫超高壓連續流細胞破碎儀提供周密的保護,最大限度地保持蛋白質活性,具體表現在:

①du創的沖洗系統及進口鏡面拋光316L不銹鋼管道,防止樣品殘留,保證管道清潔,排除酸堿干擾。 316L不銹鋼拋光管道316L不銹鋼管道

②進樣、破碎、出樣全過程可在4~6℃低溫循環水浴中進行,避免高溫導致的蛋白質失活。

③破碎壓力0~207Mpa連續可調,便于摸索最佳破碎條件,保證溫和破碎。

上海遠慕生物科技有限公司 版權所有 地址:上海市嘉定區曹安公路5588號 郵編:201202 電話: 管理登陸
傳真:021-58999639 手機:13310162040 聯系人:俞燕熙 郵箱:m13310162040@163.com  GoogleSitemap 網址:www.planetchoco.com ICP備案號:滬ICP備14029423號-1
主營:ELISA試劑盒/染色液/溶液 /動物血清/標準品/化學試劑
點擊這里給我發消息
手機:13310162040
主站蜘蛛池模板: 免费看无码自慰一区二区| 特级小箩利无码毛片| 成人免费a级毛片无码网站入口| 亚洲国产精品无码久久久不卡| 亚洲精品无码成人片久久| 亚洲性无码一区二区三区| 国产AV天堂无码一区二区三区| 国产精品va无码一区二区| 亚洲AV永久无码精品一福利| 人妻丰满熟妞av无码区| 国产热の有码热の无码视频| 亚洲精品无码av中文字幕| 亚洲国产精品无码久久久蜜芽 | 久久精品无码一区二区日韩AV | 亚洲精品无码AV中文字幕电影网站| 潮喷失禁大喷水无码| 一本色道无码道在线| 亚洲AV无码无限在线观看不卡| 人妻丰满熟妞av无码区| 日韩人妻无码一区二区三区久久99 | 亚洲AⅤ无码一区二区三区在线| 无码A级毛片免费视频内谢| 中文无码人妻有码人妻中文字幕| 久久午夜无码鲁丝片秋霞| 欧洲人妻丰满av无码久久不卡| 天堂无码在线观看| 中文字幕无码av激情不卡| 精品无码久久久久久久久水蜜桃| 无码乱码av天堂一区二区| 久久无码人妻一区二区三区| 亚洲AV永久青草无码精品| 亚洲AV无码欧洲AV无码网站| 亚洲av永久无码精品网站 | 亚洲国产精品无码久久青草| 精品无码成人久久久久久| 日韩久久无码免费毛片软件 | 无码专区—VA亚洲V天堂| 无码一区二区三区视频| 亚洲AV永久无码区成人网站| 亚洲日韩乱码中文无码蜜桃 | 乱人伦人妻中文字幕无码|